外文摘要：NOVELTY - Rapidly detecting and preventing food-borne toxin contamination of flow injection luminescent bacteria comprises inoculating Vibrio qinghaiensis, culturing, programming flow injection system, detecting flow injection luminescence bacteria, data integrating, processing, and designing alarm system.
USE - Method for rapidly detecting and preventing food-borne toxin contamination of flow injection luminescent bacteria (claimed).
ADVANTAGE - The method is fast, simple, automated, repeatable, and non-polluting. The indicator has improved sensitivity and wide detection range.
主权项：1.一种快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其特征在于，包括如 下步骤： (1)青海弧菌Q67菌剂复苏、接种和连续培养； (2)流动注射系统程序设计； (3)流动注射发光细菌法检测； (4)数据集成和处理及报警系统的设计。 2.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，所述流动注射发光细菌法的具体步骤如下： (1)青海弧菌Q67菌剂复苏、接种和连续培养：取-20℃青海弧菌Q67冻干粉安瓿1支，消 毒、4℃预冷15min后，加入复苏液轻微振荡，于超净工作台内接种1000μL菌悬液至1000mL液 体培养基中，25℃、120rpm振荡培养16h至最佳发光状态，得到测试用菌液并转移至连续培 养发酵罐进行连续培养； (2)流动注射系统程序设计：流动注射进样器程序设定如表1； 表1设定流动注射进样器程序 (3)流动注射发光细菌法检测：将步骤(1)连续培养的测试用菌液通过流动注射进样器 泵入超微弱发光检测系统，以超纯水作为空白对照，得到稳定的发光信号后，导入待测样品 溶液进行发光检测得到相应的发光强度； (4)数据集成和处理及报警系统的设计：设计数据集成和处理及报警系统由依次连接 的光电倍增管、光电转换及电压放大模块、模数转换模块、定量检测模块和报警器组成；步 骤(3)检测得到的光信号经光电倍增管放大以后，通过光电转换及电压放大模块，再经过模 数转换模块得到数字信号，经定量检测模块得到相对发光强度；相对发光强度＝(样品发光 强度/对照发光强度)×100％，当定量检测模块检测到相对发光强度小于80％时触发报警 器报警。 3.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(1)所述液体培养基按以下步骤配制并进行灭菌处理后转移至补料储液罐 中：称取胰蛋白胨5g、酵母粉5g、NaCl 6.73g、Na2CO3 0.99g、NaHCO3 0.57g、MgCl2·6H2O 2.92g、MgSO4 2.47g、CaCO3 0.03g、NaBr 0.1g、以及KCl 0.22g，逐一加入1L的三角烧瓶中， 加甘油3mL，加蒸馏水1000mL，混匀过滤去沉淀，用牛皮纸包扎后121℃灭菌15min。 4.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述样品溶液为含有3-硝基丙酸或含有秋水仙碱的水溶液。 5.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述样品溶液为饮用水、食品加工企业的水源、甘蔗样品溶液或新鲜黄 花菜样品溶液。 6.根据权利要求5所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述待测样品溶液为饮用水时，步骤(4)中相对发光强度在80％以下则 表明饮用水可能受到污染，经定量检测模块分析后触发报警器报警。 7.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述检测过程中，测试用菌液和样品溶液提前预混合然后由磷酸缓冲液 载入超微弱发光检测系统进行检测。 8.根据权利要求7所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述样品溶液与测试用菌液在检测过程中混合时间为10s，检测时间为 60s。 9.根据权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法，其 特征在于，步骤(3)所述检测过程中，测试用菌液补料速度根据检测速度调整以保证菌液始 终保持相对恒定的发光强度。 10.如权利要求1所述的快速检测和预警食源性毒素污染的流动注射发光细菌法在食 品加工企业的水源污染监控、饮用水在线监控、以及饮用水中突发性食源性毒素污染检测 中的应用。
申请号：CN201611041464.2
公开/公告号：CN106442483A
申请日：2016-11-22
公开/公告日：2017-02-22
申请/专利权人：暨南大学
发明/设计人：唐书泽;张旭辉;吴事正;朱曜
分类号：G01N21/76;G01N35/08
主分类号：G01N21/76
法律状态：实质审查
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