中文摘要：本发明公开了一种转基因油菜RF1、Oxy235、RF3多重实时荧光定量PCR检测试剂盒及应用，该试剂盒包括以下引物和探针：CruA‑F/R、CruA‑Probe、RF1‑F/R、RF1‑Probe、Oxy235‑F/R、Oxy235‑Probe、RF3‑F/R和RF3‑Probe。本发明通过提取待测样品DNA作为模板，加入上述的引物及探针，进行实时荧光定量PCR检测，根据探针上的标记物、Ct值和预期扩增曲线判断检测样品中是否含有RF1、Oxy235或RF3转化体成分。本发明仅一次PCR反应可快速、准确的定性和定量检测出油菜内标基因和3种转基因油菜品系，本发明具有成本低、通量高的优点。
外文摘要：The present invention discloses a transgenic rape RF1, Oxy235, RF3 multiple real-time fluorescence quantitative PCR kit and its use, the kit comprising the following primer and probe : CruA - F/R, CruA - Probe, RF1 - F/R, RF1 - Probe, Oxy235 - F/R, Oxy235 - Probe, RF3 - F/R and RF3 - Probe. By extracting the sample to be measured as the template DNA, add the above-mentioned primer and probe, real-time fluorescence quantitative PCR detection, according to the probe on the label, Ct value and the expected amplification curve judge the detection whether a sample contains the RF1, Oxy235 or RF3 transformant component. The present invention only a PCR reaction can be fast, accurate qualitative and quantitative detection of internal standard gene and leaves the rape 3 transgenic rape strain, this invention has low cost, the advantages of high flux.
主权项：一种转基因油菜RF1、Oxy235、RF3多重实时荧光定量PCR检测引物及探针，其特征在于，包括以下引物序列：RF1-F：5′-AATTTGGCCTGTAGACCT-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；RF1-R：5′-TACACGCGACTCATCATCC-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；RF1-Probe：5′-Cy3-CTATTCGGGCCTAACTTTTGGTGTG-BHQ2-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；Oxy235-F：5′-TTCTAATTTCAAACTATTCGGGCCTA-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；Oxy235-R：5′-GACAGTTCTGCTCCATCTTCG-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；Oxy235-Probe：5′-Cy5-TAACTTGCCAGTCAGCATCATCACAC-BHQ2-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；RF3-F：5′-AGCATTTAGCATGTACCATCAGACA-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；RF3-R：5′-CATAAAGGAAGATGGAGACTTGAG-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；RF3-Probe：5′-JOE-CGCACGCTTATCGACCATAAGCCCA-BHQ1-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；CruA-F：5′-GGCCAGGGTTTCCGTGAT-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；CruA-R：5′-CCGTCGTTGTAGAACCATTGG-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；CruA-Probe：5′-FAM-AGTCCTTATGTGCTCCACTTTCTGGTGCA-BHQ1-3′，其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。
申请号：CN201710880188.7
专利号：CN107385106A
公开/公告号：CN107385106A
申请/专利权人：农业部环境保护科研监测所;
发明/设计人：修伟明; 鲁军; 李刚; 赵建宁; 杨殿林
分类号：C12Q1/68; C12N15/11;
主分类号：C12Q1/68
法律状态：实质审查
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