中文摘要:本发明涉及基于Au
主权项:1.一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建,其特征在于,包括以下步骤:
(1)用Al 2O 3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL 1.0~1.6 mg/ mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO 2-CuO纳米棒CeO 2-CuO-NH 2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 1~5 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为0.5% ~ 2%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3) 滴加6 µL 10 -4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇Th的二抗标记物Au@Ag@Ab 2@Th,超纯水冲 洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
2.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建的制备方法,所述的Au纳米颗粒杂化氨基化CeO 2-CuO纳米棒CeO 2-CuO-NH 2-Au NPs分散液,其特征在于,制备步骤如下:
(1)CeO 2纳米棒的制备
将10~200 mg CeCl 3·7H 2O在磁力搅拌下溶解于1~50 mL无水乙醇中并加入1.3 mL 0.75 mol/L的H 2SO 4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于10~ 200 °C下加热1~50 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置1~10天,将产 物洗涤干燥即得到CeO 2纳米棒;
(2)CeO 2-CuO纳米棒的制备
将1~10 mg Cu(CH 3COO) 2·H 2O溶解到16 mL乙醇中,然后将1~100 mg CeO 2纳米棒加入上 述溶液中并在1~200 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥1~10 h制得 CeO 2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO 2-CuO纳米棒CeO 2-CuO-NH 2-Au NPs的制备将制得的CeO 2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷 70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO 2-CuO,将氨基化CeO 2-CuO加入Au NPs洗涤干 燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO 2-CuO纳米棒CeO 2-CuO-NH 2-Au NPs。
3.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构 建的制备方法,所述的Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab 2@Th,其特征在 于,制备步骤如下:
(1)Au@Ag异质结纳米棒的制备
将1~200 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二 醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳 米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab 2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mL Au@Ag 异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1 mL 的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡1~5 h,得到的产物14500 rpm离心分离, 固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab 2@Th。
4.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建的制备方法,其特征在于,用于玉米赤霉烯酮的检测,制备步骤如下:
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为4~6 mmol/L铁氰化钾和 10 -2~10 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~ 0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。
申请号:CN201710039883.0
专利号:CN106645351-A
公开/公告号:CN106645351A
申请/专利权人:济南大学
发明/设计人:吴丹;张彤;任祥;韩清志;邢彬;张勇;魏琴;张国庆
分类号:G01N27/327;G01N33/558
主分类号:G01N27/327
法律状态:实质审查
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