一种双竞争法适配体检测试纸条及其应用

Double-competitive aptamer detection test strip useful for detecting aflatoxin B1 comprises bottom plate, sample absorbent pad, marker pad, reaction film and absorbent pad, absorbent pad and marker pad coated with detection probe

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中文摘要:本发明涉及生物医学检测领域,具体而言,涉及一种双竞争法适配体检测试纸条及其应用。所述试纸条包括样品吸收垫、标记物垫、反应膜、吸水垫和底板;所述标记物垫包被有检测探针,所述检测探针为标有用于显示信号强度的指示剂的检测靶标物的适配体;所述反应膜上设置有检测区和质检区;所述检测区固定包被有靶标物抗原;所述质检区固定包被有质控探针;所述质控探针的核酸序列与所述适配体的核酸序列互补。
主权项:1.一种双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述试纸条包括底板和依次设置在底板上的样品吸收垫、标记物垫、反应膜以及吸水垫;
所述标记物垫包被有检测探针,所述检测探针为标有用于显示信号强度的指示剂的检测靶标物的适配体;
所述反应膜上设置有检测区和质检区;
所述检测区固定包被有靶标物抗原;
所述质检区固定包被有质控探针;所述质控探针的核酸序列与所述适配体的核酸序列互补。
2.根据权利要求1所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,当所述靶标物为有机物大分子靶标时,所述靶标物抗原即为靶标物本身;
当所述靶标物为无机小分子靶标时,所述靶标物抗原为所述无机小分子靶标与载体蛋白的偶联物。
3.根据权利要求2所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述载体蛋白包括酪蛋白、牛血清白蛋白或鸡卵清白蛋白。
4.根据权利要求1所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述质控探针通过末端修饰生物素-亲和素固定到所述质控区。
5.根据权利要求1所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述显示信号强度的指示剂包括荧光物质、量子点、地高辛标记探针、生物素、放射性同位素、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种。
6.根据权利要求5所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述荧光物质包括 Alexa 350、Alexa 405、Alexa 430、Alexa 488、Alexa 555、Alexa 647、AMCA、氨基吖啶、 BODIPY 630/650、BODIPY 650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G、BODIPY-TMR、BODIPY-TRX、5-羧 基-4′,5′-二氯-2′,7′-二甲氧基荧光素、5-羧基-2′,4′,5′,7′-四氯荧光素、5-羧基荧光 素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、Cascade Blue、Cy2、Cy3、Cy5、Cy7、 6-FAM、丹磺酰氯、荧光素、HEX、6-JOE、NBD(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑)、Oregon Green 488、Oregon Green 500、Oregon Green5 14、Pacific Blue、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、间苯 二甲酸、甲酚固紫、甲酚蓝紫、亮甲酚蓝、对氨基苯甲酸、赤藓红、酞菁、偶氮甲碱、花青、黄嘌呤、琥珀酰荧光素、稀土金属穴状化合物、三双吡啶基二胺铕、铕穴状化合物或螯合物、二 胺、双花青苷、La Jolla蓝染料、别藻蓝蛋白、allococyanin B、藻蓝蛋白C、藻蓝蛋白R、硫 胺、藻红青蛋白、藻红蛋白R、REG、罗丹明绿、罗丹明异硫氰酸酯、罗丹明红、ROX、TAMRA、TET、TRIT(四甲基罗丹明异硫醇)、四甲基罗丹明和德克萨斯红中的任一种。
7.根据权利要求5所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述放射性同位素 包括110In、111In、177Lu、18F、52Fe、62Cu、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、86Y、90Y、89Zr、94mTc、94Tc、99mTc、120I、123I、124I、 125I、 131I、 154-158Gd、 32P、 11C、 13N、 15O、 186Re、 188Re、 51Mn、 52mMn、 55Co、 72As、 75Br、 76Br、82mRb和 83Sr中的任一种。
8.根据权利要求5所述的双竞争法适配体检测试纸条,其特征在于,所述酶包括辣根过氧化酶、碱性磷酸酶和葡萄糖氧化酶中的任一种。
9.权利要求1~8任一项所述的双竞争法适配体检测试纸条在检测黄曲霉毒素B1中的应用。
10.使用权利要求1~8任一项所述的双竞争法适配体检测试纸条检测靶标物含量的方法,其特征在于,包括:
1)、用试纸条检测靶标物标准品,得到标准品在试纸条的检测区和质控区的信号强度比值,制作靶标标准品的浓度对应信号强度比值的线性回归曲线,计算回归方程;
2)、用试纸条检测待测样品,得到待测样品在试纸条的检测区和质控区的信号强度比值,根据步骤1)得到回归方程,得到所述待测样品中靶标物的含量。
申请号:CN201610874889.5
专利号:Numbers:CN106645709-A
公开/公告号:CN106645709A
申请/专利权人:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明/设计人:陈爱亮;朱超;张桂兰;黄亚飞
分类号:G01N33/558;G01N21/64;G01N21/78
主分类号:G01N33/558
法律状态:实质审查
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:虞德容
  3. 编译时间:2018-01-31