中文摘要：本发明公开了一种黄曲霉毒素B1半抗原、人工抗原及其高灵敏度、高特异性卵黄抗体的制备方法。本发明首先将黄曲霉毒素B1分子上双呋喃环中的碳碳双键进行加成反应引入游离羧基形成黄曲霉毒素B1半抗原，其结构式如式（I）所示：式（Ⅰ）；再将该半抗原与载体蛋白偶联得到黄曲霉毒素B1人工抗原；由该人工抗原乳化后免疫鸡，得到黄曲霉毒素B1卵黄抗体。所述抗体对黄曲霉毒素B1的半抑制浓度（IC50）为4.23ng/mL，定量检测范围为0.29~61.83ng/mL，检测限为0.06ng/mL，且该抗体对AFB2、AFG1和AFG2的交叉反应率均低于1%。本发明的抗体同时具备高灵敏、特异性的特点，具有广阔的应用前景。
主权项：1.一种黄曲霉毒素B 1半抗原，其特征在于，其结构式如式（I）所示：
式（I）。
2.权利要求1所述黄曲霉毒素B 1半抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将黄曲 霉毒素B 1溶解于乙腈后，与乙醇酸和三氟乙酸进行反应，反应产物经乙酸乙酯和饱和食盐 水萃取后，用无水硫酸钠干燥，最后液相纯化得到黄曲霉毒素B 1半抗原。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述液相纯化的流动相为乙腈和水，或流动相为0.1% 乙酸，柱温35℃，流速1 mL/min。
4.一种黄曲霉毒素B 1人工抗原，其特征在于，是由权利要求1所述黄曲霉毒素B 1半抗原 经活泼酯法和载体蛋白偶联得到。
5.根据权利要求4所述的黄曲霉毒素B 1人工抗原，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清蛋白或钥孔血蓝蛋白。
6.一种黄曲霉毒素B 1卵黄抗体的制备方法，其特征在于，将权利要求4所述黄曲霉毒素B 1人工抗原乳化后免疫鸡，得到黄曲霉毒素B 1卵黄抗体。
7.根据权利要求6所述黄曲霉毒素B 1卵黄抗体的制备方法，其特征在于，免疫鸡后，采用 盐析法分离纯化鸡蛋蛋液得到黄曲霉毒素B 1卵黄抗体。
8.权利要求6或7所述方法制备得到的黄曲霉毒素B 1卵黄抗体。
10.权利要求8所述黄曲霉毒素B 1卵黄抗体或权利要求9所述试剂盒在黄曲霉毒素B1的 免疫检测中的应用。
9.一种检测黄曲霉毒素B 1的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含有权利要求8所述的黄曲霉毒素B 1卵黄抗体。
申请号：CN201610875386.X
专利号：CN106565737-A
公开/公告号：CN106565737A
申请/专利权人：华南农业大学
发明/设计人：雷红涛；张雅琼；沈兴；陆宁；徐振林；孙远明；杨金易；肖治理
分类号：C07D493/14；C07K14/765；C07K14/795；C07K16/02；C07K16/14；G01N33/53
主分类号：C07D493/14
法律状态：实质审查
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