中文摘要：本发明公开了一种伏马毒素检测方法，包括如下步骤：步骤一，将FB1半抗原分别与KLH和OVA偶联，得到FB1-KLH和FB1-OVA；步骤二，用所述FB1-KLH作为免疫原，采用常规方法制备抗FB1的单克隆抗体。本发明检测对象针对性强，准确率高，灵敏度较市售ELISA检测试剂盒高，并且由于本发明采用抗伏马毒素B1单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，较市售的以多克隆抗体为基础的ELISA试剂盒有更强的特异性，减少了假阳性率。
主权项：1.一种伏马毒素检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将FB1半抗原分别与KLH和OVA偶联，得到FB1-KLH和FB1-OVA；步骤二，用所述FB1-KLH作为免疫原，采用常规方法制备抗FB1的单克隆抗体；步骤三，将所述单克隆抗体加入EP管中，使用洗涤液洗涤，将待侧样品进行萃取，得到萃取液，该萃取液稀释后加入所述管中，震荡；步骤四，去除上清液，使用洗涤液洗涤，将所述OVA-FB1加入所述管中，震荡；步骤五，去除上清液，使用洗涤液洗涤，将抗FB1单克隆抗体加入所述管中，震荡；步骤六，去除上清液，使用洗涤液洗涤，加入发光底物，震荡，测定发光值；步骤七，根据已知不同浓度FB1与抗FB1单克隆抗体加入后得到的发光值，制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的FB1浓度。
2.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，在所述步骤三中，所述萃取液的稀释倍数为5倍。
3.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，在所述步骤三中，所述萃取的方法为：取样品，按照重量体积比1：10的比例加入70％甲醇-PBS溶液，剧烈震荡15min，静置30min，将上清液通过快速定性滤纸过滤，即得萃取液。
4.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，所述稀释液为pH8.2的0.1M磷酸缓冲液，所述磷酸缓冲液含有体积比为0.01％的Tween-20。
5.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，在所述步骤三中，所述震荡步骤为室温震荡10-20分钟。
6.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，在所述步骤六中，所述震荡步骤为室温震荡5-10分钟。
7.根据权利要求1所述的伏马毒素检测方法，其特征在于，在所述步骤四中，所述上清液的去除使用磁力架完成
申请号：CN201611069339.2
专利号：CN106771213
公开/公告号：CN106771213A
申请/专利权人：百奥森（江苏）食品安全科技有限公司
发明/设计人：周合；张根义；张进；周朱晨；杨敏；胡彬；吴念绮
分类号：G01N33/577
主分类号：G01N33/577
法律状态：实质审查
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