中文摘要：本发明公开了一种粮食中玉米赤霉醇检测方法及试剂盒，包括玉米赤霉醇标准品、β-玉米赤霉醇标准品、α-玉米赤霉烯醇标准品、β-玉米赤霉烯醇标准品、玉米赤霉酮标准品、玉米赤霉烯酮标准品、生物素化玉米赤霉醇、抗鼠IgG偶联受体磁珠、链亲和素供体磁珠、抗玉米赤霉醇单克降抗体和检测缓冲液，其中所述抗鼠IgG偶联受体磁珠包括100μg/mL受体磁珠，0.05％的Proclin-300和PH7.4的PBS溶液；链亲和素供体磁珠包括100μg/mL供体磁珠，25mM的HEPES、100mM的NaC1溶液和0.1~0.2％的Proclin-300。本发明方法能克服传统的检测方法存在的检测周期长、步骤繁琐、费时费力等缺点，使检测时间大大缩短，操作步骤和劳动强度也大为缩减，达到省时省力、快速灵敏的要求。
主权项：1.一种粮食中玉米赤霉醇检测方法及试剂盒，其特征在于，包括玉米赤霉醇标准品、β-玉米赤霉醇标准品、α-玉米赤霉烯醇标准品、β-玉米赤霉烯醇标准品、玉米赤霉酮标准品、玉米赤霉烯酮标准品、生物素化玉米赤霉醇、抗鼠IgG偶联受体磁珠、链亲和素供体磁珠、抗玉米赤霉醇单克降抗体和检测缓冲液，其中所述抗鼠IgG偶联受体磁珠包括100μg/mL受体磁珠，0.05％的Proclin-300和PH7.4的PBS溶液；链亲和素供体磁珠包括100μg/mL供体磁珠，25mM的HEPES、100mM的NaC1溶液和0.1~0.2％的Proclin-300；称取1g琼脂糖凝胶基质粉末，溶于1mmol/LHCl中，然后置于烧结玻璃过滤器中使用1mmol/LHCl洗涤15min；配体偶联使用偶联缓冲液0.2mol/LNaHCO3pH8.3溶解待偶联的β-玉米赤霉醇抗体和氯霉素抗体，获得抗体溶液，迅速将活化的琼脂糖凝胶基质转移到所述抗体溶液中，充分混匀上述的混和物2-4h；配体封闭封闭所有残留的活性基团，转移经处理的琼脂糖凝胶基质至0.1mol/ LTris-HCl缓冲液中，室温条件下静置2-4h；除去偶联后未偶联上的多余的配体依次用0.1mol/L醋酸/醋酸钠缓冲液和0.1mol/LTris-HCl缓冲液对经处理后的琼脂糖凝胶基质进行洗涤，至少洗涤3个循环。
2.根据权利要求1所述的粮食中玉米赤霉醇检测方法及试剂盒，其特征在于，所述所述抗鼠IgG偶联受体磁珠为1mg/mL，链亲和素供体磁珠为1mg/mL，抗玉米赤霉醇单克隆抗体为1mg/mL，生物素化玉米赤霉醇0.5mg/mL；使用时，以总体积25μL计：其中抗鼠IgG偶联受体磁珠5μL、链亲和素供体磁珠5μL、抗玉米赤霉醇单克降抗体5μL、生物素化玉米赤霉醇5μL、待 测样品5μL。
申请号：CN201611060193.5
专利号：CN106771262-A
公开/公告号：CN106771262A
申请/专利权人：无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司
发明/设计人：徐静；赵春城；胡勇；蒋韦艳；刘金杰；吴敏芳；朱倩倩
分类号：G01N33/74
主分类号：G01N33/74
法律状态：实质审查
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