中文摘要：本发明公开了一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，包括如下具体步骤：称取一定量的花生糖磨碎过筛后加入石油醚-甲醇混合溶液中，调节pH后倒入均质机内均质；静置一段时间后用滤纸吸去上层石油醚层，过滤后得到花生糖甲醇提取液；将花生糖甲醇提取液经过超声处理后稀释，离心取上清液备用，得到黄曲霉素样品；通过酶联免疫法测定黄曲霉素样品中黄曲霉素含量。本发明通过结合甲醇提取与酶联免疫法测定花生糖中黄曲霉素的含量，超声波的辐射压强可以增大花生糖样品中物质分子运动频率和速度，提高提取效率，本发明降低了检测成本，提高了检测效率，满足了检疫标准确定量分析的需要。
主权项：1.一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于，包括如下具体步骤：
S1、称取一定量的花生糖磨碎后过筛；
S2、将S1中磨碎的花生糖粉末加入石油醚-甲醇混合溶液中，调节pH为6-8的范围，之后 倒入均质机内均质5-10min；
S3、将S2均质后的花生糖有机溶液静置一段时间，用滤纸吸去上层石油醚层，过滤后得到花生糖甲醇提取液；
S4、将S3中得到的花生糖甲醇提取液于25℃条件下超声处理20-30min，超声功率800-1200w；
S5、将S3中得到的滤液稀释，离心取上清液备用，得到黄曲霉素样品；
S6、用移液枪分别移取100μL所述黄曲霉素样品与等量黄曲霉素B 1标准品至微孔条中，先分别加入200μL酶联偶合物，之后在微孔条底部分别加入200μL抗体，培养一段时间后，加入100μL反应终止液终止反应，得到黄曲霉素待测液和黄曲霉素B1标准品待测液；
S7、将S7中得到黄曲霉素待测液和黄曲霉素B1标准品待测液用酶标仪于450nm滤镜与630nm示差滤镜下读取光密度值；
S8、根据S7中得到的光密度值，以黄曲霉素B1标准品浓度的对数为横坐标，黄曲霉素B1标准品的光密度值为纵坐标绘制标准曲线，根据标准曲线读取并计算花生糖中黄曲霉素B1含量。
2.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S1中过10-30目筛。
3.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：S2中所述石油醚-甲醇混合溶液中石油醚和甲醇的体积比为1:6。
4.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S2中用1mol/L HCl或1mol/L NaOH调节pH。
5.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S3中静置时间为30-60min。
6.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S5中加入等体积蒸馏水稀释。
7.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S5中离心速率为1000-2000r/min，离心时间为5-10min。
8.根据权利要求1所述的一种花生糖中黄曲霉毒素潜在污染的鉴定方法，其特征在于：所述S6中培养温度为25℃，培养环境为避光环境，培养时间为20-40min。
申请号：CN201610649307.3
专利号：CN106290821-A
公开/公告号：CN106290821A
申请/专利权人：安徽青松食品有限公司
发明/设计人：林松
分类号：G01N33/535；G01N33/53
主分类号：G01N33/535
法律状态：实质审查
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