用于新烟碱基杀虫剂的免疫测定法

Immunoassays for neonicotinoid insecticides, e.g., for determining if the correct amount of insecticide has been applied, and new antibodies, haptens and immunogens

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中文摘要:本发明提供了用于生成抗新烟碱类抗体的免疫原,以及用于通过免疫测定法来测定样品中一种或多种新烟碱类杀虫剂的存在情况的抗体、方法、试剂、和试剂盒。本发明可具体用于测定应用于植物繁殖材料(诸如种子)的新烟碱类杀虫剂的浓度,所述抗体对具有通式(I)的化合物具有选择性,其中A是2-氯吡啶-5-基或2-氯噻唑-5-基;R和R3独立地是氢或C1-C4烷基;R1和R2独立地是氢或C1-C4烷基,或者R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成咪唑烷或噁二嗪环;且X是N-NO2或N-CN。本发明还要求保护具有通式(IA)的化合物和具有通式(II)的蛋白质缀合物,其中PR指选自下组的载体分子蛋白质残基:来自双翅目病毒的纯化蛋白质衍生物(PPD,结核菌素)、牛血清清蛋白、阳离子化的牛血清清蛋白、人血清清蛋白、卵清蛋白、和匙孔血蓝蛋白;或者选自下组的酶残基:碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、和β-半乳糖苷酶。
外文摘要:
NOVELTY - Antibodies useful in immunoassays for determination of neonicotinoid insecticides (NIs) are new. Immunogens useful for producing the antibodies, haptens useful in producing these immunogens, and an assay which used the antibodies, are also new.

USE - Compounds (IA) can be used to prepare immunogenic materials of formula (II). (II) are useful for stimulating production of the desired antibodies. The antibodies are useful in assays, such as that described above, for detection of NIs. Detection of NIs is important in management of the use of NIs, e.g., to determine if the correct amount of NI has been applied, for control of insect resistance or because of environmental or worker exposure concerns.

主权项:1.在测定样品中新烟碱类杀虫剂含量的免疫测定法中有用的抗 体,其中所述抗体(1)是通过用缀合了免疫原性载体蛋白的新烟碱类半 抗原免疫动物而生成的多克隆抗体,且(2)可特异性结合新烟碱类杀虫 剂。 2.权利要求1的抗体,其中所述抗体对具有通式(I)的化合物具 有选择性 其中A是2-氯吡啶-5-基或2-氯噻唑-5-基; R和R3独立地是氢或C1-C4烷基; R1和R2独立地是氢或C1-C4烷基,或者R1和R2与它们所连接的氮 原子一起形成咪唑烷或噁二嗪环;且 X是N-NO2或N-CN。 3.权利要求1的抗体,其中所述抗体对选自下组的化合物具有选 择性:吡虫啉、硝胺烯啶、吡虫清、thiamethoxam、thiacloprid、和 氯噻啶。 4.具有通式(IA)的化合物 R3是氢或C1-C4烷基; R1和R2独立地是氢或C1-C4烷基,或者R1和R2与它们所连接的氮 原子一起形成咪唑烷或噁二嗪环; n是1-4的整数;且 5.权利要求4的化合物,其具有通式 6.权利要求5的化合物,其具有通式 7.权利要求4的化合物,其具有通式 8.权利要求7的化合物,其具有通式 9.具有通式(II)的蛋白质缀合物 n是1-4的整数; X是N-NO2或N-CN;且 PR是选自下组的载体分子蛋白质残基:来自双翅目病毒的纯化蛋 白质衍生物(PPD,结核菌素)、牛血清清蛋白、阳离子化的牛血清清 蛋白、人血清清蛋白、卵清蛋白、和匙孔血蓝蛋白;或者是选自下 组的酶残基:碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、和β-半乳糖苷酶。 10.权利要求9的蛋白质缀合物,其具有通式 11.权利要求9的蛋白质缀合物,其具有通式 12.测定样品中新烟碱类杀虫剂浓度的方法,包括下列步骤: (1)提供具有对所述新烟碱类杀虫剂有选择性的固定化抗体的固相; (2)在存在已知量的新烟碱类杀虫剂半抗原-酶缀合物时,使所述 样品接触该固定化抗体; (3)清洗步骤(2)的固相,以除去任何未结合的半抗原-酶缀合物或 样品; (4)使对所述半抗原-酶缀合物具有特异性的显色底物与步骤(3) 清洗的固相发生反应,以生成色素原;并 (5)测量由步骤(4)生成的色素原的量,以测定结合抗体的半抗原- 酶缀合物的量,由此得到所述样品中新烟碱类杀虫剂的量。 13.权利要求12的方法,其中所述样品是通过在合适溶剂中提取 植物繁殖材料而获得的。 14.权利要求13的方法,其中所述植物繁殖材料是种子。 15.权利要求14的方法,其中所述种子选自下组:芸苔、高粱、 小麦、棉花、大田玉米、或甜玉米。 16.权利要求12的方法,其中所述抗体是通过用缀合了免疫原性 载体蛋白的新烟碱类杀虫剂免疫动物而生成的多克隆抗体。 17.权利要求16的方法,其中所述免疫原性载体蛋白是选自下组 的载体分子:来自双翅目病毒的纯化蛋白质衍生物(PPD,结核菌素)、 牛血清清蛋白、阳离子化的牛血清清蛋白、人血清清蛋白、卵清蛋白、 和匙孔血蓝蛋白。 18.在测定样品中新烟碱类杀虫剂含量的免疫测定法中有用的试 剂盒,其中所述试剂盒在一个或多个容器中包含下列组合: (1)具有对所述新烟碱类杀虫剂有选择性的固定化抗体的固相; (2)包含缀合了新烟碱类半抗原的酶的酶缀合物。 19.权利要求18的试剂盒,其中所述抗体是通过用缀合了免疫原 性载体蛋白的新烟碱类免疫动物而生成的多克隆抗体。 20.权利要求19的试剂盒,其中所述酶是辣根过氧化物酶。 21.权利要求18的试剂盒,其中所述抗体可特异性结合选自下组 的新烟碱类杀虫剂:吡虫啉、硝胺烯啶、吡虫清、thiamethoxam、 thiacloprid、和氯噻啶。
申请号: CN00817771.6
专利号: CN1413195
公开/公告号: CN1413195
申请日:2000-12-06
公开/公告日:2003-12-23
申请/专利权人:辛根塔参与股份公司
发明/设计人: J·F·布拉迪;D·P·西蒙斯
分类号: C07D213/61(2006.01) C07D277/32(2006.01) C07D417/06(2006.01) C07D401/06(2006.01) A01N43/40(2006.01) A01N43/50(2006.01) A01N43/78(2006.01) A01N43/88(2006.01) G01N33/53(2006.01) C07K16/00(2006.01)
主分类号: C07D213/61(2006.01)
法律状态:有权-审定授权
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:贵淑婷
  3. 编译时间:2018-05-07