中文摘要：发明的目的是针对现有酶抑制型生物传感器的不足之处，提供了一种检测微痕量有机磷农药的可视化识别方法。采用本发明对有机磷农药进行检测，一方面，由于未对AChE进行固定化处理，采用AChE酶液，使AChE保持了最大酶活力，提高了检测灵敏度。另一方面，所用提取液提高了对待测样品中有机磷农药的提取回收率，使检测灵敏度提高至0.01ng/L。本发明方法可广泛应用于粮食、蔬菜、水果等农产品及环境中的微痕量有机磷农药的残留检测中，也可用于农产品和环境安全评价、监控有机磷农药的污染情况等。

外文摘要：

NOVELTY - Detecting organic phosphorus pesticide comprises evenly mixing acetyl cholinesterase enzyme in organic solvent including acetone, ethanol and acetylthiocholine solution, and water, adding the solution in array film sensing material to check color change of pH, drying, scanning to obtain color array image, extracting solvent to detect organic phosphorus pesticide residue, washing to-be tested sample to collect washing liquid, reacting, identifying the to be tested sample solution, and comparing and analyzing to observe standard solution.

USE - The method is useful for detecting organic phosphorus pesticide (claimed) in *grain*, *vegetable* and *fruit* plants.

ADVANTAGE - The method detects organic phosphorus pesticide to monitor pollution of plant, to improve recycling rate and detection sensitivity to 0.01 ng/l.

主权项： 

1.本发明的一种有机磷农药检测方法，其特征在于，所述的方法包括如 下的步骤：

1）建立空白溶液标准图谱：

将AChE酶液、有机溶剂丙酮和氯化硫代乙酰胆碱溶液搅拌混合均匀； 将用受pH影响而发生颜色变化的物质作为传感材料的阵列膜片放入浸 泡反应，反应后将膜片干燥，进行扫描，获得的彩色阵列图像为空白 溶液标准图谱；

2）建立有机磷农药标准图谱：

将AChE酶液和有机磷农药搅拌混合进行酶抑制反应，然后在反应溶液 中加入氯化硫代乙酰胆碱；再将用受pH影响而发生颜色变化的物质作 为传感材料的阵列膜片放入浸泡反应，反应后干燥膜片，进行扫描， 获得的彩色阵列图像为有机磷农药标准图谱；

3）待测样品的有机磷农药残留检测：

用提取液对待测样品进行冲洗，收集冲洗液作为待测样品液；

将AChE酶液和待测样品液混合进行酶抑制反应，然后在反应溶液中加 入氯化硫代乙酰胆碱；再将用受pH影响而发生颜色变化的物质作为传 感材料的阵列膜片放入浸泡反应，反应后干燥膜片，进行扫描，获得 的彩色阵列图像为待测样品液图谱；

4）结果分析：

定性识别：将待测样品液图谱分别与空白溶液标准图谱及有机磷农药 标准图谱进行对比分析，肉眼观察，当待测样品液图谱与空白溶液标 准图谱相同时，则待测样品中不含有机磷农药；待测样品液图谱与有 机磷农药标准图谱相同时，则待测样品中含有该已知有机磷农药，从 而实现待测样品中有机磷农药的有无识别以及有机磷农药种类的识别 ；

定量分析：用Photoshop图像处理软件分别提取空白溶液标准图谱、有 机磷农药标准图谱及待测样品液图谱中每个阵列点的红（R）、绿（G ）、蓝（B）三色值，再用SPSS统计分析软件对提取的RGB数据进行聚 类分析，得到树状图，根据待测样品液图谱RGB数据在树状图上的分类 情况确定待测样品液中含有的有机磷农药的浓度，从而实现待测样品 中有机磷农药的定量分析。

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2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的受pH影响而发生颜色变化 的物质为pH指示剂或水溶性卟啉衍生物。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述的pH指示剂为溴甲酚绿、溴 甲酚紫、刚果红、氯酚红、溴酚蓝、溴酚红、间胺黄、甲基红、溴百 里酚蓝、 甲酚红、亮黄、硝嗪黄、百里酚蓝、靛蓝胭脂红中的任一种或几种。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述的水溶性卟啉衍生物为单磺 酸基四苯基卟啉或四磺酸基四苯基卟啉。 

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的AChE酶液、有机溶剂丙酮 和氯化硫代乙酰胆碱溶液的数量比为：AChE酶1酶活单位（UN）:0.01 7～0.018体积单位有机溶剂丙酮:0.066～0.146摩尔单位氯化硫代乙酰 胆碱。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的提取液是丙酮:乙醇:水按 体积比为3:1:1混合而成。

 
申请号：CN201310331556.4
公开/公告号： CN103421880A
申请日：2013-08-01
公开/公告日：2013-12-04
申请/专利权人：中国石油大学（华东）
发明/设计人： 杨丽敏;姜磊;刘振;李友训
分类号： C12Q1/46 G01N21/80
主分类号：C12Q1/46
法律状态：有权-审定授权
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