外文摘要:
NOVELTY - Test strip comprises test board (1), sample dropping unit (2), detection unit comprising nanoparticle labeled conjugate pad (3), test line (4) and control line (5), and sample collection unit (6), where the sample dropping unit, detection unit and sample collection unit are sequentially connected to the test board, the test line is located between nanoparticle labeled conjugate pad and control line, and the nanoparticle labeled conjugate pad comprises antigen coating solution and fluorescent upconverting nanoparticle labeled antibody sample.
USE - The test strip is useful for detecting pesticide residues (claimed) in food products.
ADVANTAGE - The test strip is cost-effective, and has high speed, specificity and sensitivity for detecting pesticide residues in food.
主权项:
1.检测农药残留试纸,其特征在于所述试纸包含:试纸板、样品滴加单元、检测单元以 及样品回收单元;
样品滴加单元、检测单元以及样品回收单元依次相连且均连接于所述试纸板上;
所述样品滴加单元与样品回收单元位于所述试纸板的两端,所述检测单元位于所述试 纸板的中间;
所述检测单元包含纳米粒子标记结合垫、检测线和质控线;所述检测线位于所述纳米 粒子标记结合垫和所述质控线之间;所述纳米粒子标记结合垫包含抗原包被液以及上转换 荧光纳米粒子标记抗体试样;所述上转换荧光纳米粒子标记抗体试样为β-NaYF 4:Yb 3+/Er 3+ 标记2,4-D-IgG的PBS溶液。
2.根据权利要求1所述的检测农药残留试纸,其特征在于,所述检测线以及质控线均位 于层析膜上,纳米粒子标记结合垫与所述层析膜相连;所述层析膜为NC硝酸纤维素膜。
3.根据权利要求1所述的检测农药残留试纸,其特征在于,所述纳米粒子标记抗体试样 中β-NaYF 4:Yb 3+/Er 3+标记2,4-D-IgG的含量为0.00666-0.132μg。
4.根据权利要求1所述的检测农药残留试纸,其特征在于,所述检测线上的标记物为2, 4-D-OVA,所述质控线的标记物为羊抗兔二抗。
5.检测农药残留试纸的制备方法,其特征在于,包含下列步骤:
S1.制备稀土上转换纳米材料;
S2.制备农药多克隆抗体以及检测所述农药多克隆抗体的效价;
S3.利用所述步骤S1制备的产物标记所述农药多克隆抗体;
S4.利用所述步骤S3产物制备检测农药残留试纸。
6.根据权利要求5所述的检测农药残留试纸的制备方法,其特征在于,所述步骤S1包 含:
S1.1将稀土氯化物、油酸以及十八烯置于烧瓶中搅拌抽真空30min,后停止搅拌加热;
S1.2将NaOH、NH 4HF 2以及甲醇置于烧杯中放入搅拌子,封上封口膜,于磁力搅拌器上常 温搅拌;
S1.3将所述步骤S1.1产物加热到150℃,保温15~20min即可,随即关闭搅拌,关闭加 热,使之降低至室温;
S1.4尽量少进空气的情况下滴加S1.2所述溶液,反应完全后通入N 2,将滴加过程中将进 入的空气排尽;
S1.5将体系加热至75-85℃,保温1.5h;
S1.6在0.5h内将所述步骤S1.5的产物升温至310℃,N 2保护下保温2h,随即在N 2保护及 搅拌下冷却至室温;
S1.7洗涤产物;
S1.8利用所述步骤S1.7产物制备水溶性β-NaYF 4:Yb,Er纳米粒子。
7.根据权利要求6所述的检测农药残留试纸的制备方法,其特征在于,所述步骤S1.8包 含:
S1.8.1将所述步骤S1.7的产物、环己烷、叔丁醇、去离子水以及K 2CO 3溶液室温下混合搅 拌;
S1.8.2将KMnO 4和NaIO 4水溶液缓慢滴入所述步骤S1.8.1的产物,40℃下反应48h,用 95%乙醇洗涤离心得初产物;
S1.8.3初产物溶于HCl中,常温下搅拌反应,反应结束后离心洗涤离心得到产物。
8.根据权利要求5所述的检测农药残留试纸的制备方法,其特征在于,所述步骤S3包 含:
S3.1分别配置pH=5以及pH=7.4的磷酸缓冲盐溶液;
S3.2制备水溶性β-NaYF 4:Yb,Er标记2,4-D-IgG。
9.根据权利要求8所述的检测农药残留试纸的制备方法,其特征在于,所述步骤S3.2 为:
S3.2.1取经KMnO 4-NaIO 4氧化溶于水的β-NaYF 4:Yb,Er制成溶液A,向所述溶液A中加入 所述步骤S3.1制备的pH=5的PBS缓冲液后,加入EDC与Sulfo-NHS,常温搅拌;
S3.2.2向所述步骤S3.2.1的产物中加入2,4-D-IgG,常温反应2h,离心出产物;将所述 产物用PBS洗2遍后定容于所述步骤S3.1制备的pH=7.4的PBS缓冲液中。
申请号: CN201610590578.6
公开/公告号: CN106018374A
申请日:2016-07-26
公开/公告日:2016-10-12
申请/专利权人:大连民族大学
发明/设计人: 华瑞年;国婷婷;张伟;于基成;那立艳
分类号: G01N21/64 G01N33/558
主分类号: G01N21/64
法律状态:审中-实质审查
点击下载:一种基于上转换荧光纳米粒子快速检测农药残留的免疫层析试纸及其制备方法