外文摘要：
NOVELTY - Indirect impedance method useful for rapidly detection of commercial sterile acidic canned food comprises: e.g.(i) preparing experimental bacteria; (ii) opening of acid canned food and preparing sample solution; (iii) determining critical value by indirect impedance method; (iv) taking measured acid canned food, where in step (ii) preparing of sample solution by mixing of 1 ml of fresh 0.2% potassium hydroxide with polystyrene in measuring flask, inoculating sample solution into an inner bottle equipped with an acid broth culture medium and inoculating.
USE - The indirect impedance method is useful for rapidly detection of commercial sterile acidic canned food (claimed).
ADVANTAGE - The method is simple, rapid, sensitive, economical and has high accuracy.
主权项：1.一种间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征在于，包括以下步 骤： 步骤1：制备实验菌液； 步骤2：开启酸性罐头食品并制备样品液； 步骤3：间接阻抗法的临界值的确定； 步骤4：取被测酸性罐头食品，按步骤2的方法制备成被测样品液；在聚苯乙烯测量瓶中 加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取被测样品液接种至装有酸性肉汤培养基的内瓶中，另 取等量被测样品液接种至装有麦芽浸膏汤培养基的内瓶中，内瓶完全开放，立即旋紧测量 瓶，于15min内将其放入BacTrac4300培养箱中；输入各测量参数后进行检测； 步骤5：在开启的被测酸性罐头食品中，以无菌操作取出不少于30mL（g）被测酸性罐头 食品内容物放至灭菌容器内留样，保存在2～5℃冰箱中，待该被测酸性罐头食品得出检验 结论后可弃去； 步骤6：按国家标准GB 4789.26-2013对开启的被测酸性罐头食品内容物进行感官检查 和pH测定，对留样内容物和内瓶的培养液进行涂片染色镜检； 步骤7：当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果为无IDT值时，表明被测酸性罐头食 品中无微生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证无微生物增殖现象时，可报告 该被测酸性罐头食品为商业无菌；当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果IDT＞0时，表 明被测酸性罐头食品中有微生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证有微生物增 殖现象时，可报告该被测酸性罐头食品为非商业无菌。 2.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤1所述制备实验菌液的方法为：取实验菌株多粘芽孢杆菌、肠膜明串珠菌和异常 汉逊酵母，将多粘芽孢杆菌和肠膜明串珠菌分别接种至酸性肉汤培养基，异常汉逊酵母接 种至麦芽浸膏汤培养基，36℃培养72h，然后将各培养物用无菌生理盐水进行10倍稀释即得 实验菌液。 3.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤2所述开启酸性罐头食品的方法为：去除酸性罐头食品表面标签，在包装容器表 面用防水的油性记号笔做好标记，并记录容器、编号、产品性状、泄漏情况、是否有小孔或锈 蚀、压痕、膨胀及其他异常情况；称量酸性罐头食品并记录；用冷水和洗涤剂清洗酸性罐头 食品的光滑面；水冲洗后用无菌毛巾擦干；以含4%碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面15min后用 无菌毛巾擦干，在密闭罩内点燃至表面残余的碘乙醇溶液全部燃烧完；采用易燃包装材料 包装的酸性罐头食品不能灼烧，以含4%碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面30min后用无菌毛巾 擦干；在超净工作台或百级洁净实验室中开启；带汤汁的酸性罐头食品开启前应适当振摇； 使用无菌开罐器在消毒后的罐头光滑面开启一个适当大小的口，开罐时不得伤及卷边结 构，每一个罐头单独使用一个开罐器，不得交叉使用；如酸性罐头食品为软包装，可以使用 灭菌剪刀开启，不得损坏接口处；立即在开口上方嗅闻气味，并记录。 4.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤2所述制备样品液的方法为：液体酸性罐头食品摇匀后可直接作为样品液使用， 固体酸性罐头食品则称取25g加至225mL灭菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质，两者 皆有时则各取12.5g加至225mL灭菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质混匀得到样品 液。 5.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤3所述间接阻抗法的临界值的确定方法为：在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制 备的0.2%KOH溶液，各取1mL实验菌液分别接种至装有5mL相应培养基的内瓶中，内瓶完全开 放，立即旋紧测量瓶，于15min内将其放入BacTrac4300培养箱中进行检测；各测量参数预设 置为：培养温度：36℃，测量间隔时间：10min，测量持续时间:72h，预热时间：1h，临界值：- 25%M；得到实验菌液检测曲线；另选取市场常见的12-15种酸性罐头食品灭菌后，按步骤2的 方法制备得到样品液，在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取1mL样品液 接种至装有5mL酸性肉汤培养基的内瓶中，另取1mL样品液接种至装有5mL麦芽浸膏汤培养 基的内瓶中，在相同条件下同时进行试验，得到阴性样品产生的基线最大漂移值，确定间接 阻抗法的临界值。 6.根据权利要求5所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，所述实验菌液中实验菌株为多粘芽孢杆菌和肠膜明串珠菌相应培养基为酸性肉汤， 实验菌株为异常汉逊酵母相应培养基为麦芽浸膏汤。 7.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤4所述各测量参数设置为：培养温度：36℃，测量间隔时间：10min，测量持续时间： 72h，预热时间：1h，评价类型：M2；临界值：步骤3得到的临界值。 8.根据权利要求1所述的间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征 在于，步骤4所述被测样品液、酸性肉汤培养基和麦芽浸膏汤培养基的加样量均为3mL。 9.一种间接阻抗法快速检测酸性罐头食品商业无菌的方法，其特征在于，包括以下步 骤： 步骤1：制备实验菌液； 取实验菌株多粘芽孢杆菌、肠膜明串珠菌和异常汉逊酵母，将多粘芽孢杆菌和肠膜明 串珠菌分别接种至酸性肉汤培养基，异常汉逊酵母接种至麦芽浸膏汤培养基，36℃培养 72h，然后将各培养物用无菌生理盐水进行10倍稀释即得实验菌液； 步骤2：开启酸性罐头食品并制备样品液； 去除酸性罐头食品表面标签，在包装容器表面用防水的油性记号笔做好标记，并记录 容器、编号、产品性状、泄漏情况、是否有小孔或锈蚀、压痕、膨胀及其他异常情况；称量酸性 罐头食品并记录；用冷水和洗涤剂清洗待检酸性罐头食品的光滑面；水冲洗后用无菌毛巾 擦干；以含4%碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面15min后用无菌毛巾擦干，在密闭罩内点燃至表 面残余的碘乙醇溶液全部燃烧完；采用易燃包装材料包装的酸性罐头食品不能灼烧，以含 4%碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面30min后用无菌毛巾擦干；在超净工作台或百级洁净实验 室中开启；带汤汁的酸性罐头食品开启前应适当振摇；使用无菌开罐器在消毒后的罐头光 滑面开启一个适当大小的口，开罐时不得伤及卷边结构，每一个罐头单独使用一个开罐器， 不得交叉使用；如酸性罐头食品为软包装，可以使用灭菌剪刀开启，不得损坏接口处；立即 在开口上方嗅闻气味，并记录； 液体酸性罐头食品摇匀后可直接作为样品液使用，固体酸性罐头食品则称取25g加至 225mL灭菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质，两者皆有时则各取12.5g加至225mL灭 菌林格氏溶液或蛋白胨缓冲液中进行均质混匀得到样品液； 步骤3：间接阻抗法的临界值的确定； 在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，各取1mL实验菌液分别接种至 装有5mL相应培养基的内瓶中，内瓶完全开放，立即旋紧测量瓶，于15min内将其放入 BacTrac4300培养箱中进行检测；各测量参数预设置为：培养温度：36℃，测量间隔时间： 10min，测量持续时间:72h，预热时间：1h，临界值：-25%M；得到实验菌液检测曲线；另选取市 场常见的12-15种酸性罐头食品灭菌后，按步骤2的方法制备得到样品液，在聚苯乙烯测量 瓶中加入1mL新鲜制备的0.2%KOH溶液，取1mL样品液接种至装有5mL酸性肉汤培养基的内瓶 中，另取1mL样品液接种至装有5mL麦芽浸膏汤培养基的内瓶中，在相同条件下同时进行试 验，得到阴性样品产生的基线最大漂移值，确定间接阻抗法的临界值为-45%M；所述实验菌 液中实验菌株为多粘芽孢杆菌和肠膜明串珠菌相应培养基为酸性肉汤，实验菌株为异常汉 逊酵母相应培养基为麦芽浸膏汤 步骤4：取黄桃罐头，按步骤2的方法制备成被测样品液；在聚苯乙烯测量瓶中加入1mL 新鲜制备的0.2%KOH溶液，取3mL被测样品液接种至装有3mL酸性肉汤培养基的内瓶中，另取 等量被测样品液接种至装有3mL麦芽浸膏汤培养基的内瓶中，内瓶完全开放，立即旋紧测量 瓶，于15min内将其放入BacTrac4300培养箱中；输入各测量参数：培养温度：36℃，测量间隔 时间：10min，测量持续时间：72h，预热时间：1h，评价类型：M2；临界值：-45%M，进行检测； 步骤5：在开启的黄桃罐头中，以无菌操作取出30g黄桃罐头内容物放至灭菌容器内留 样，保存在2℃冰箱中，待该黄桃罐头得出检验结论后可弃去； 步骤6：按国家标准GB 4789.26-2013对开启的黄桃罐头内容物进行感官检查和pH测 定，对留样内容物和内瓶的培养液进行涂片染色镜检； 步骤7：当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果为无IDT值时，表明黄桃罐头中无微 生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证无微生物增殖现象时，可报告该黄桃罐 头为商业无菌；当BacTrac4300检测结束后，仪器测量结果IDT＞0时，表明黄桃罐头中有微 生物增殖，经感官检查、pH测定、涂片染色镜检确证有微生物增殖现象时，可报告该黄桃罐 头为非商业无菌。
申请号： CN201611025311.9
公开/公告号： CN106706717A
申请日：2016-11-18
公开/公告日：2017-05-24
申请/专利权人： 广西壮族自治区分析测试研究中心
发明/设计人： 杜寒春;叶开富;刘绍刚;谭学才;邓卫利;刘永强;陈桂鸾;叶苁佑
分类号： G01N27/12
主分类号： G01N27/12
法律状态：审中-实质审查
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