外文摘要:NOVELTY - Mycotoxin detecting device comprises colloidal gold quantitative detection cartridge, hand-held reader instrument. The mycotoxin is aflatoxin B1, M1, zearalenone, deoxynivalenol, T2 toxin, ochratoxin or fumonisin.
USE - Mycotoxin detecting device.
ADVANTAGE - The mycotoxin detecting device enables to provide accurate and quantitative results rapidly in simple manner.
主权项:
1.一种霉菌毒素类胶体金定量检测装置,其特征在于:包括胶体金定量检测盒和手持 式读卡仪器,所述检测装置对待检测的霉菌毒素样品给出准确的定量检测结果,该霉菌毒 素包括黄曲霉B1、M1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T2毒素、赭曲霉毒素和伏马菌素。
2.根据权利要求1所述的一种霉菌毒素类胶体金定量检测装置,其特征在于:所述定量 检测结果为根据手持式读卡仪测出的检测线T线的显色强度和C线的显色强度比值控制和 待测霉菌毒素样品中霉菌毒素的含量呈相关定量涵数关系,设置为仪器的内标准曲线,该 手持式读卡仪器通过成像系统测量C/T线的反射光强度,并通过随机芯片将检测结果通过 无限网络传输到中央系统或云端服务器;该手持式读卡仪器包括智能手机、塑料模具、镜 片、玻璃板、9V电池、LED灯带、抽屉式托盘。
5.根据权利要求2所述的一种霉菌毒素胶体金定量检测装置,其特征在于:所述函数关 系式为:y=aln(x)-b或y=ax -b,其中y代表T/C值;,x代表浓度;a代表斜率;b代表位移;
3.根据权利要求1或2所述的一种霉菌毒素胶体金定量检测装置,其特征在于:所述霉 菌毒素样品为玉米、大豆、饲料、小麦、酒糟、豆粕;其中样品称量克数在2-5g,按1:5体积的 60-90%的甲醇缓冲液进行霉菌毒素提取,取50-150ul的样品处理液加入检测卡中,反应 10-20min后把检测卡放入手持式读卡仪中读出起不同浓度的T/C值进行函数拟合建立内标 准曲线。
4.根据权利要求3所述的一种霉菌毒素胶体金定量检测装置,其特征在于:所述内标准 曲线中每个批次的产品的内标准曲线进行相应调整,这样减少了不同批次产品间定量分析 关系的差别,确保不同批次产品对同一待测物定量检测关系的一致性。
6.根据权利要求3所述的一种霉菌毒素胶体金定量检测装置,其特征在于:根据标准品 的不同浓度和对应的T/C值建立内标曲线,用内标曲线去检测含有不同浓度的自然样品,计 算出各个浓度自然样品的实际提取率;将原来的标准品浓度分别除以提取率后,再计算出 标准品浓度在折算后不同浓度的T/C值建立最终曲线,上传到软件制成二维码方便客户操 作使用。
7.根据权利要求1-3中任一项所述的一种霉菌毒素类胶体金定量检测装置,其特征在 于:所述霉菌毒素类胶体金定量检测盒,包括卡盒和试剂条,试剂条由基板、样品垫、胶体金 垫、反应膜和吸水垫组成,胶体金垫上吸附有胶体金标记的霉菌毒素类单克隆抗体和牛血 清白蛋白,反应膜上包被有检测抗原和质量控制抗体,检测抗原显示为检测线T,为霉菌毒 素类抗原;质量控制抗体显示为质控线C,为羊抗鼠IgG抗体。
8.根据权利要求1或7所述的一种霉菌毒素类胶体金定量检测装置的制备方法,其特征 在于:所述检测盒中的试剂条制备方法包括以下步骤,所用原料用量份数为重量份:
(1)胶体金的制备:
将500份蒸馏水加热至沸腾后,再加入氯金酸1-10份和柠檬酸三钠1-10份,搅拌并煮沸 10min,冷却至常温;
(2)胶体金的标记及喷金:
取100份胶体金溶液,加入1.38%的硼酸缓冲液8-12份,搅拌中加入2.2-2.8mg/ml的霉 菌毒素类单克隆抗体45-53份继续搅拌8-12min,再加入15-18%的牛血清白蛋白18-22份进 行偶联,10000r/min离心4-7min,去掉上清,留下清金颗粒溶液进行喷金使用;
用喷金划膜机在玻璃纤维素膜上喷金,用量3-10ul/cm,浓度是0.5ug-10ug/cm,再在温 度35-38℃下干燥10-14h,密封保存备用;
(3)硝酸纤维素膜的C/T画线:
用BC缓冲液将羊抗鼠IgG稀释成0.5-3mg/ml的羊抗鼠IgG溶液,在PVC底板上贴好硝酸 纤维素膜中间用羊抗鼠IgG按照0.5-3ul/cm画C线;
用BT缓冲液将霉菌毒素类抗原稀释成0.5-3mg/ml,在PVC底板上贴好硝酸纤维素膜C线 往下用稀释后的霉菌毒素抗原按照0.5-9ul/cm画T线;
将画好线的PVC底板在温度35-38℃下干燥12-24h,密封保存备用;
(4)胶体金大板的制作:
在步骤(3)中的PVC底板上贴上喷好金的玻璃纤维塑模,贴上样品垫及吸水纸即可。
9.根据权利要求8所述的一种霉菌毒素类胶体金定量检测盒的制备方法,其特征在于: 所述胶体金颗粒大小为20-80nm,胶体金质量浓度为0.8-1.2%。
10.根据权利要求8所述的一种霉菌毒素类胶体金定量检测装置的制备方法,其特征在 于:所述样品垫使用前进行处理:
其中,100ml的BY缓冲液配方为:10%tw20+表面活性剂5-10%+5%PEG20000+15%海 藻糖+PVPK405g,用蒸馏水定容到100ml。
申请号: CN201610259985.9
公开/公告号: CN105785014A
申请日:2016-04-25
公开/公告日:2016-07-20
申请/专利权人: 成都盛泰尔生物医药科技有限公司
发明/设计人: 蔡文胜;刘文副;李丹;胡俊峰;徐江波;马路春
分类号: G01N33/577 G01N33/558
主分类号: G01N33/577
法律状态:审中-实质审查
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