小麦3种病毒的多重RT-PCR同步检测技术及应用

Wheat yellow mosaic virus, Chinese wheat mosaic virus and rice black streaked dwarf virus multiplex reverse transcription polymerase chain reaction synchronous detection method comprises annealing and extending the primers

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中文摘要:本研究涉及植物病毒检测,提供了一种小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)、中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)及水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)的多重RT-PCR检测技术及其在田间的应用。根据3种病毒的外壳蛋白基因保守序列设计引物,筛选退火温度一致的特异引物,并对PCR的反应体系及扩增条件进行优化建立了通过一次PCR反应中即可检测出3种小麦病毒病害的方法。该技术应用于田间样品的检测,能对这3种病毒的发生情况和危害程度及时预警,为病害防控提供依据。
主权项:一种涉及小麦黄花叶病毒(Wheat?yellow?mosaic?virus,WYMV)、中国小麦花叶病毒(Chinese?wheat?mosaic?virus,CWMV)和水稻黑条矮缩病毒(Rice?black?streaked?dwarf?virus,RBSDV)的多重RT?PCR同步检测技术,其特征在于引物序列如Seq?ID?No.1,Seq?ID?No.2,Seq?ID?No.3,Seq?ID?No.4所示,Taq?DNA聚合酶浓度0.025U/μL,dNTP浓度0.25mmol/L,退火温度56℃,延伸时间60s,循环次数30次。该技术灵敏度高,在cDNA稀释1000倍时仍然能检测出3种病毒。
申请号:CN201511022454.X
公开/公告号:CN105400909A
申请日:2015-12-09
公开/公告日:2016-03-16
申请/专利权人:山东农业大学
发明/设计人:李向东;魏姣;田延平
分类号:C12Q-001/68
主分类号:C12Q-001/68
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:贵淑婷
  3. 编译时间:2016-11-08