一种检测转基因CaMV35S启动子的电极的制备方法及用途

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中文摘要:本发明提供了一种检测转基因CaMV35S启动子电极的制备方法及用途,包括:还原氧化石墨烯/金纳米复合材料RGO/Au的制备步骤;硅@碲化镉纳米复合材料Si@CdTe的制备步骤;在ITO电极上制备探针1(Probe1)的步骤;向探针1(Probe1)修饰目标DNA(t-DNA)CaMV35S启动子的步骤;向目标DNA(t-DNA)CaMV35S启动子修饰探针2(Probe2)的步骤。本发明通过rGO/Au NPs和Si@CdTe两端双重信号放大,实现了对转基因CaMV35S启动子的灵敏检测,在0.05~100pM的浓度区间内,CaMV35S浓度与光电流呈现良好的线性关系,检出限可达0.017pM。
主权项:一种检测转基因CaMV35S启动子电极的制备方法,其特征在于,包括:步骤1、还原氧化石墨烯/金纳米复合材料RGO/Au的制备步骤;步骤2、二氧化硅纳米微球@碲化镉纳米复合材料SiO2@CdTe的制备步骤;步骤3、在ITO电极上制备探针1的步骤:将RGO/Au分散于蒸馏水中得到RGO/Au分散液后滴涂于ITO电极表面的修饰区,进行干燥;取溶有探针1的tris-HCl缓冲液滴涂于所述干燥后的RGO/Au表面,进行干燥;冲洗电极表面后,进行干燥,得到ITO-rGO/Au-Probe1;步骤4、向探针1修饰目标DNA CaMV35S启动子的步骤:取溶有目标DNA?CaMV35S启动子的tris-HCl缓冲液滴涂于所述ITO-rGO/Au-Probe1的表面,室温孵育,待干燥后冲洗电极,得到ITO-rGO/Au-Probe1-t-DNA;步骤5、向目标DNA CaMV35S启动子修饰探针2的步骤:将SiO2@CdTe的蒸馏水分散液和N-羟基琥珀酰亚胺的水溶液加入到乙基-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐的水溶液中进行反应,反应结束后,离心并洗涤得到固体A,将所得固体A加入到溶有探针2的tris-HCl缓冲液中,得到混合液A,振荡反应一段时间后,得到固体产物Probe2/SiO2@CdTe;将Probe2/SiO2@CdTe分散于蒸馏水中后,得到混合液B,将混合液B滴涂于所述ITO-rGO/Au-Probe1-t-DNA表面,孵育,待干燥后冲洗电极表面,得到ITO-rGO/Au-Probe1-t-DNA-Probe2/SiO2@CdTe。
申请号:CN201510848286.3
专利号:CN105372307-A
公开/公告号:CN105372307A
申请日:2015-11-27
公开/公告日:2016-03-02
申请/专利权人:江苏大学
发明/设计人:李雅琪;王坤;蔡建荣;孙力
分类号:G01N27/327
主分类号:G01N27/327
法律状态:有效
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:郭婷
  3. 编译时间:2016-10-28