尖孢镰刀菌核酸序列定性标准样品及其制备方法

Qualitative Fusarium oxysporum nucleus acid sequence standard sample for detecting complexity of fungal *toxin*, comprises internal transcribed spacer, ribosomal rRNA18S gene, ribosome rRNA28S gene, and polyketone synthetase gene sequences

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中文摘要:本发明属于生物技术领域,特别涉及一种尖孢镰刀菌核酸序列定性标准样品及其制备方法。采集对数生长期的尖孢镰刀菌,提取总DNA,进行特异性PCR扩增测序后,对质粒进行制备。本发明方法制备出的核酸序列标准样品不再具有生物活性,不存在生物污染和传染的问题,解决了分子生物学阳性对照的来源问题,且样品稳定,无污染,易保存。本发明根据尖孢镰刀菌具有分类学意义的核酸序列技术指标,解决尖孢镰刀菌核酸序列标准样品溯源参照系与参照指标问题,并应用于本标准样品的定值分析中,获得具有真正溯源意义的尖孢镰刀菌核酸序列标准样品,在国内核酸序列分类定级标准样品的研制方面具有重要意义。
主权项:一种尖孢镰刀菌核酸序列定性标准样品,其特征在于:所述尖孢镰刀菌核酸序列定性标准样品包含的序列为:内转录间隔区基因(ITS)序列:TCCGTAGGTGAACCTGCGGAGGGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCCTGTGAACATACCACTTGTTGCCTCGGCGGATCAGCCCGCTCCCGGTAAAACGGGACGGCCCGCCAGAGGACCCCTAAACTCTGTTTCTATATGTAACTTCTGAGTAAAACCATAAATAAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCAAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCACAGCTTGGTGTTGGGACTCGCGTTAATTCGCGTTCCCCAAATTGATTGGCGGTCACGTCGAGCTTCCATAGCGTAGTAGTAAAACCCTCGTTACTGGTAATCGTCGCGGCCACGCCGTTAAACCCCAACTTCTGAATGTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATAGGAGGCGAATAAC;核糖体rRNA?18S基因(18S)序列:GTAGTCATATGCTTGTCTCAAAGATTAAGCCATGCATGTCTAAGTATAAGCAATTATACAGCGAAACTGCGAATGGCTCATTATATAAGTTATCGTTTATTTGATAGTACCTTACTACTTGGATAACCGTGGTAATTCTAGAGCTAATACATGCTAAAAATCCCGACTTCGGAAGGGATGTATTTATTAGATTAAAAACCAATGCCCTTTCGGGGCTCACTGGTGATTCATGATAACTCCTCGAATCGCATGGCCTTGTGCCGGCGATGGTTCATTCAAATTTCTTCCCTATCAACTTTCGATGTTTGGGTATTGGCCAAACATGGTTGCAACGGGTAACGGAGGGTTAGGGCTCGACCCCGGAGAAGGAGCCTGAGAAACGGCTACTACATCCAAGGAAGGCAGCAGGCGCGCAAATTACCCAATCCCGACACGGGGAGGTAGTGACAATAAATACTGATACAGGGCTCTTTTGGGTCTTGTAATTGGAATGAGTACAATTTAAATCCCTTAACGAGGAACAATTGGAGGGCAAGTCTGGTGCCAGCAGCCGCGGTAATTCCAGCTCCAATAGCGTATATTAAAGTTGTTGTGGTTAAAAAGCTCGTAGTTGAACCTTGGGCCTGGCTGGCCGGTCCGCCTCACCGCGTGTACTGGTCCGGCCGGGCCTTTCCCTCTGTGGAACCCCATGCCCTTCACTGGGTGTGGCGGGGGAAACAGGACTTTTACTGTGAAAAAATTAGAGTGCTCCAGGCAGGCCTATGCTCGAATACATTAGCATGGAATAATAGAATAGGACGTGTGGTTCTATTTTGTTGGTTTCTAGGACCGCCGTAATGATTAATAGGGACAGTCGGGGGCATCAGTATTCAATTGTCAGAGGTGAAATTCTTGGATTTATTGAAGACTAACTACTGCGAAAGCATTTGCCAAGGATGTTTTCATTAATCAGGAACGAAAGTTAGGGGATCGAAGACGATCAGATACCGTCGTAGTCTTAACCATAAACTATGCCGACTAGGGATCGGACGGTGTTATTTTTTGACCCGTTCGGCACCTTACGAGAAATCAAAGTGCTTGGGCTCCAGGGGGAGTATGGTCGCAAGGCTGAAACTTAAAGAAATTGACGGAAG;核糖体rRNA?28S基因(28S)序列:GTGAAATTGTTGAAAGGGAAGCGTTTATGACCAGACTTGGGCTTGGTTAATCATCTGGGGTTCTCCCCAGTGCACTTTTCCAGTCCAGGCCAGCATCAGTTTTCCCCGGGGGATAAAGGCGGCGGGAATGTGGCTCTCTTCGGGGAGTGTTATAGCCCACCGTGTAATACCCTGGGGGGGACTGAGGTTCGCGCATCTGCAAGGATGCTGGCGTAATGGTCATCAACGACCCGTCTTGAAACACGGACCAAGGAGTC;尖孢镰刀菌18S特异基因(F.Oxy)序列:TACCACTTGTTGCCTCGGCGGATCAGCCCGCTCCCGGTAAAACGGGACGGCCCGCCAGAGGACCCCTAAACTCTGTTTCTATATGTAACTTCTGAGTAAAACCATAAATAAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCAAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCACAGCTTGGTGTTGGGACTCGCGTTAATTCGCGTTCCTCA;玉米赤霉烯酮毒素聚酮合成酶基因(PKS)序列:CTGAGAAATATCGCTACACTACCGACAACGTAGGAATGGCCCAGGGATTCCTGATCTACGCTGTCAGGGCAGGGATACTCCTAAGGTATGTTTCAAATGACCGATGCATCAACACACTCGTGTATTTTCAATCTAGATGGGCAAAGCATGAACCAAGTCTATTGAGTACAGACGAAAATCAACCTGAGTGGG。
申请号:CN201610099759.9
专利号:CN105567849-A
公开/公告号:CN105567849A
申请日:2016-02-23
公开/公告日:2016-05-11
申请/专利权人:蒋丹 ; 刘淑艳 ; 丁健 ; 富瑶
发明/设计人:蒋丹 ; 刘淑艳 ; 丁健 ; 富瑶 ; 郑江
分类号:C12Q1/68 ; C12Q1/04 ; C12N15/63 ; C12N15/10
主分类号:C12Q1/68
法律状态:实质审查
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:任妮
  3. 编译时间:2016-11-23