中文摘要：本发明涉及分子生物学，具体公开了一种检测转基因作物的方法，针对转基因作物的内源基因、外源基因和转基因品系旁临序列设计内、外引物，先将所有内、外引物混合，进行第一轮循环数较少(15cycles)的高通量多重富集PCR，再运用内引物进行第二轮荧光定量PCR，结果根据扩增曲线和熔融曲线分析，显著增加了所述方法的成功率和稳定性，可实现高通量检测转基因作物的目的。本发明所述方法的灵敏度高于普通荧光定量PCR约1个数量级；拥有和普通荧光定量PCR相同的定量能力；特异性强，为转基因作物的检测提供了更有效的方法。

主权项：一种检测转基因作物的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)针对待测样品的内源基因、外源基因及转基因品系旁临序列，各设计内引物对和外引物对；(2)筛选特异性高、灵敏度高的内引物对和外引物对；(3)提取待测样品DNA作为模板，利用步骤(2)筛选得到的内外引物进行PCR扩增，得到扩增产物；(4)以步骤(3)获得的扩增产物为模板，利用步骤(2)筛选得到的内引物对进行荧光定量PCR，检测荧光信号，根据SYBR Green I通道下的循环阈值(Ct值)判断待测样品的外源基因是否存在。
申请号： CN201610237272.2
专利号：CN105779611-A
公开/公告号：CN105779611A
申请日：2016-04-15
公开/公告日：2016-07-20
申请/专利权人：中国检验检疫科学研究院
发明/设计人：付伟；吴希阳；魏霜；刘津；朱鹏宇；王晨光；林春贵；朱水芳
分类号：C12Q1/68；C12N15/11
主分类号：C12Q1/68
法律状态：实质审查
点击下载：一种高通量的多重富集定量PCR(ME-qPCR)检测转基因作物元件及品系的方法