真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测方法及检测试剂盒

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中文摘要:本发明公开一种真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测方法及检测试剂盒。该方法包括:先将DONApt与单链信号探针ssDNA杂交,形成DONApt-ssDNA杂交链;然后向其加入待测样品,当待测样品存在DON时,DONApt-ssDNA与DON反应生成DONApt-DON,并释放ssDNA;体系中剩余DONApt-ssDNA杂交链经DNA扩增形成双链DNA;双链DNA在外切酶催化下水解成单核苷酸除去,而体系中ssDNA被保留;再向体系中加入银离子和还原剂,在ssDNA诱导下,银离子还原生成近红外荧光银纳米簇;最后依据近红外荧光强度与DON的量的关系,计算待测样品中的DON含量。
主权项:一种真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)脱氧雪腐镰刀菌烯醇核酸适体DONApt与单链信号探针ssDNA杂交,形成DONApt?ssDNA杂交链;(2)向DONApt?ssDNA杂交链体系中加入待测样品中,当待测样品中有DON时,DONApt?ssDNA杂交链中DONApt的部分能选择性地与DON反应,生成DONApt?DON,同时释放出单链信号探针ssDNA;(3)体系中剩余的DONApt?ssDNA杂交链经DNA扩增,形成双链DNA,双链DNA在核酸外切酶III选择性地催化作用下水解成单核苷酸而除去,体系中单链信号探针ssDNA被保留下来;(4)制备近红外银纳米簇:向该体系中加入柠檬酸钠、银离子溶液和还原剂,单链信号探针ssDNA诱导银离子还原生成强荧光的近红外银纳米簇;(5)检测体系的近红外荧光强度,根据近红外荧光强度与DON浓度的关系计算待测样品中的DON的含量。
申请号:CN201610132667.6
公开/公告号:CN105695473A
申请日:2016-03-09
公开/公告日:2016-06-22
申请/专利权人:湖南科技大学
发明/设计人:曾云龙 ; 陈佳鑫 ; 林雨欢 ; 邓克勤 ; 易守军 ; 黄昊文 ; 夏晓东 ; 唐春然
分类号:C12N15/115 ; G01N33/53 ; G01N21/64
主分类号:C12N15/115
法律状态:实质审查
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:任妮
  3. 编译时间:2016-11-27