一种利用液相芯片同时检测五种食源性致病菌的基因探针及检测方法

Gene probe used for detecting five food-borne pathogenic bacteria, such as Salmonella invA invasion protein, comprises nucleobases

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中文摘要:本发明涉及农副产品安全检测技术领域,具体涉及一种利用液相芯片同时检测五种食源性致病菌的引物及检测方法,所述检测方法包括以下步骤:设计五种食源性致病菌的特异性引物和基因探针;制备被检测的五种食源性致病菌DNA模板;将五种食源性致病菌进行PCR扩增;将五种食源性致病菌的基因探针与微球偶联得到微球探针并验证;将得到的PCR扩增产物与所述微球探针进行杂交;步骤六:检测杂交产物的荧光信号,对五种食源性致病菌进行定量分析。本发明成功建立一种可以同时快速检测五种常见食源性致病菌,变异系数在2%以内,特异性为100%,灵敏度可达100CFU/mL,与荧光PCR技术相当,可应用于食源性疾病的临床和环境标本进行高通量快速检测。

主权项:一种利用液相芯片同时检测五种食源性致病菌的基因探针,其特征在于,包括以下用于检测五种食源性致病菌的基因探针:用于检测沙门氏菌的侵袭蛋白invA基因的探针:其探针核苷酸序列为NH2?5’TTTTTTTTTTTTACCTATCTGGTTGATTTCCTG?3’;用于检测单增李斯特菌的Hly基因的探针:其探针核苷酸序列为NH2?5’TTTTTTTTTTTTCGCCTGCAAGTCCTAAGA?3’;用于检测金黄色葡萄球菌的sa442基因的探针:其探针核苷酸序列为NH2?5’TTTTTTTTTTTTTTGCATCGGAAACATTGT?3’;用于检测霍乱弧菌的hlyA基因的探针:其探针核苷酸序列为NH2?5’TTTTTTTTTTTT?ATGCGATTGCCCAAGA?3’;用于检测副溶血弧菌toxR基因的探针:其探针核苷酸序列为NH2?5’TTTTTTTTTTTTACAAGGCTCGACGGC?3’。
申请号:CN201510725905.X
公开/公告号:CN105200153A
申请日:2014-03-01
公开/公告日:2013-12-30
申请/专利权人:广州市疾病预防控制中心
发明/设计人:吴新伟 ; 肖性龙 ; 伍业健 ; 陶霞 ; 杨智聪
分类号:C12Q1/68 ; C12Q1/14 ; C12Q1/10 ; C12Q1/04 ; C12N15/11 ; C12R1/42 ; C12R1/445 ; C12R1/63 ; C12R1/01
主分类号:C12Q1/68
法律状态:实质审查
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  1. 编译服务:农产品质量安全
  2. 编译者:贵淑婷
  3. 编译时间:2016-12-09