主权项:1.一种低血清高效培养猪肺炎支原体培养基,其特征在于,包括基础培养基及添加包, 所述基础培养基包括:M199、脑浸出粉、水解乳蛋白、BSA、葡萄糖、新鲜酵母提取物、Hepes、 柠檬酸铁、氯化钙.2H 2O、酚红、dd H 2O,所述添加包的组份包括胆固醇、亚油酸、亚麻酸、软脂 酸、乙醇、猪血清。
2.根据权利要求1所述的低血清高效培养猪肺炎支原体培养基,其特征在于,所述M199 的质量浓度为5-17g/L,所述脑浸出粉的质量浓度为3-15g/L,所述水解乳蛋白的质量浓度 为0.5-3g/L,所述BSA的质量浓度为2-8g/L,所述葡萄糖的质量浓度为4-8g/L,所述新鲜酵 母提取物的质量浓度为3-60g/L,所述Hepes的质量浓度为1-5g/L,所述柠檬酸铁的质量浓 度为0.01-5g/L,所述氯化钙.2H 2O的质量浓度为0.01-5g/L,所述酚红的浓度为1-6ml/L,所 述dd H 2O的质量浓度为500-2000ml/L,。
3.根据权利要求1所述的低血清高效培养猪肺炎支原体培养基,其特征在于,所述胆固 醇的质量浓度为50-90mg/L、所述亚油酸的质量浓度为30-100mg/L、所述亚麻酸的质量浓度 为30-100mg/L、所述软脂酸的质量浓度为30-100mg/L、所述乙醇的浓度为10-15ml/L、所述 猪血清的浓度为30-100mg/L。
5.根据权利要求1所述的低血清高效培养猪肺炎支原体培养基,其特征在于,所述步骤 四中添加包的制备方法具体为:
步骤一、在一个容器中加5-30ml的无水乙醇,并且将其温度控制在10-60℃;
步骤二、将胆固醇、亚油酸、亚麻酸、软脂酸及乙醇的组分缓慢加入;
步骤三、在恒温条件下对添加包混合组分进行震荡或搅拌至完全溶解;
步骤四、将步骤三中的溶液冷却至室温,同时加入猪血清;
步骤五、配制好后过滤。
4.一种利用要求1至3中任意一种所述的低血清高效培养猪肺炎支原体培养基的制备 方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一、配制基础培养基:按照基础培养基组分配方配制基础培养基;
步骤二、PH值调节:用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.4-7.6;
步骤三、灭菌:对基础培养基进行高温消毒;
步骤四、加入添加包:无菌条件下加入添加包,即制得成品。
申请号:CN201610871481.2
公开/公告号:CN106497826A
申请日:2016-09-29
公开/公告日:2017-03-15
申请/专利权人:内蒙古金源康生物工程有限公司
发明/设计人:赵峻岭
分类号:C12N1/20;C12R1/35
主分类号:C12N1/20
法律状态:实质审查
点击下载:低血清高效培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法