中文摘要：本发明涉及一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用，所述方法包括磷酸铝溶液的制备、磷酸铝溶液的置换处理、磷酸铝溶液的重悬处理。采用本方法可以实现磷酸铝佐剂表面电荷和粒径趋于稳定且pH值更加接近于人体体液pH值，适用于一种或多种抗原的吸附，符合多种疫苗在制剂中的应用需求。
主权项：1.一种磷酸铝佐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)磷酸铝溶液的制备 将碱性可溶性磷酸盐溶液以及可溶性铝盐溶液以相同的恒定流速同时滴加到反应容 器中，反应制得磷酸铝溶液，在反应过程中维持磷酸铝溶液的pH恒定在4.0-6.0； 或者，将碱性可溶性磷酸盐溶液以恒定的流速滴加到一定体积的可溶性铝盐溶液中， 反应制得磷酸铝溶液，直到pH达到4.0-6.0； 其中，所述可溶性磷酸盐包括磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢 钾中的一种或几种； 所述碱性可溶性磷酸盐溶液为由所述可溶性磷酸盐溶液和氢氧化钠溶液配制的具有 一定酸碱缓冲能力的混合溶液，其中磷酸根离子的浓度为0.290-0.430mol/L； 所述可溶性铝盐包括硫酸铝钾，硝酸铝，氯化铝中的一种或几种； 2)磷酸铝溶液的置换处理 将步骤1)制得的磷酸铝溶液与置换溶液按体积比1:3-1:5混匀，将所得混合液自然沉 降或离心后除去上清，收集磷酸铝沉淀；所述置换溶液为注射用水、生理盐水或磷酸盐缓冲 溶液； 所述磷酸盐缓冲溶液中含有：0.137mol/L NaCl，2.7mmol/L KCl，10mmol/L Na2HPO4， 2mmol/L NaH2PO4； 3)磷酸铝溶液的重悬处理 将步骤2)所得磷酸铝沉淀样品灭菌，然后进行重悬处理；即得磷酸铝佐剂溶液。 2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述流速为20-40mL/min，优选 为30mL/min。 3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述碱性可溶性磷酸盐的 pH为11.5-13.0，优选为12.5； 和/或，步骤1)所述可溶性铝盐溶液浓度为0.156mol/L。 4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述可溶性磷酸盐溶液的 浓度为0.390-0.468mol/L，优选为0.429mol/L。 5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤3)所述重悬处理为将灭菌处 理后的磷酸铝样品在搅拌速度200-800rpm条件下搅拌1-16h；优选在搅拌速度400-800rpm 条件下搅拌4-16h。 6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)磷酸铝溶液的制备 将碱性磷酸氢二钠溶液以及氯化铝溶液以相同的恒定流速同时滴加到反应容器中，反 应制得磷酸铝溶液，在反应过程中维持磷酸铝溶液的pH恒定在4.0-6.0； 或者，将碱性磷酸氢二钠溶液以恒定的流速滴加到一定体积的氯化铝溶液中，反应制 得磷酸铝溶液，直到pH达到4.0-6.0； 所述氯化铝溶液的浓度为0.156mol/L； 所述碱性磷酸氢二钠溶液为由磷酸氢二钠溶液溶液和氢氧化钠溶液配制的具有一定 酸碱缓冲能力的混合溶液，其中磷酸根离子的浓度为0.293-0.390mol/L；所述碱性磷酸氢 二钠溶液的pH为12.5；所述流速为20-40mL/min； 2)磷酸铝溶液的置换处理 将步骤1)制得的磷酸铝溶液与置换溶液按体积比1:3-1:5混匀，将所得混合液自然沉 降或离心后除去上清，收集磷酸铝沉淀；所述置换溶液为注射用水、生理盐水或磷酸盐缓冲 溶液； 所述磷酸盐缓冲溶液中含有：0.137mol/L NaCl，2.7mmol/L KCl，10mmol/L Na2HPO4， 2mmol/L NaH2PO4； 3)磷酸铝溶液的重悬处理 将步骤2)所得磷酸铝沉淀样品灭菌，然后进行重悬处理；即得磷酸铝佐剂溶液；所述重 悬处理为将灭菌处理后的磷酸铝样品在搅拌速度200-800rpm条件下搅拌1-16h。 7.权利要求1-6任一项所述方法使用的连续反应装置或批量反应装置，其特征在于，所 述连续反应装置，包括反应容器，分别盛放碱性可溶性磷酸盐溶液及可溶性铝盐溶液的贮 存容器，用于分别将碱性可溶性磷酸盐溶液、可溶性铝盐溶液以恒定流速泵入反应容器的 泵，在所述泵的输送下，碱性可溶性磷酸盐溶液和可溶性铝盐溶液通过“Y”型三通汇入同一 管道，然后进入所述反应容器；所述连续反应装置还包括用于检测所述反应容器中反应液 pH值的pH计，以及用于搅拌所述反应容器中反应液的磁力搅拌子和磁力搅拌器； 所述批量反应装置，包括反应容器，盛放碱性可溶性磷酸盐溶液的贮存容器，用于将碱 性可溶性磷酸盐溶液以恒定流速泵入反应容器的泵，所述批量反应装置还包括用于检测所 述反应容器中反应液pH值的pH计，以及用于搅拌所述反应容器中反应液的磁力搅拌子和磁 力搅拌器。 8.权利要求1-6任一项所述方法制得的磷酸铝佐剂；其特征在于，所述磷酸铝佐剂粒径 为7.5-15nm；等电点为4.0-6.0；优选地，所述磷酸铝佐剂粒径为7.5-10nm，和/或等电点为 5.0； 和/或，所述磷酸铝佐剂表面电荷为-36～36mV。 9.权利要求8所述磷酸铝佐剂在制备疫苗中的应用；所述疫苗优选为多价肺炎结合疫 苗、乙型肝炎疫苗、无细胞百白破疫苗、白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗(DTaP)、b型流感嗜 血杆菌结合疫苗。 10.含有权利要求8所述磷酸铝佐剂的疫苗；所述疫苗优选为多价肺炎结合疫苗、乙型 肝炎疫苗、无细胞百白破疫苗、白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗(DTaP)、b型流感嗜血杆菌 结合疫苗； 和/或，优选所述疫苗中磷酸铝佐剂的浓度为0.1-0.4mg/mL；进一步优选所述疫苗中铝 的最终吸附浓度为0.22-0.28mg/mL。
申请号：CN201611237397.1
公开/公告号：CN106729702A
申请日：2016-12-28
公开/公告日：2017-05-31
申请/专利权人：北京民海生物科技有限公司
发明/设计人：游哲荣;题靖;王婷婷;段霄;唐秀丽;刘建凯
分类号：A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61K3;A61P3;A61P3
主分类号：A61K3
点击下载：一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用