中文摘要：本发明涉及一种表面胍基修饰的纳米佐剂材料及其制备方法与应用，其组成为:聚乙二醇b聚己内酯g聚（胍基乙基甲基丙烯酸酯），其中εCL(ε己内酯)与BMPCL(γ(2溴2甲基丙酸酯)ε己内酯)的聚合度范围分别为30~35和3~3.5，胍基乙基甲基丙烯酸酯的聚合度为3~105。该纳米佐剂由三嵌段共聚物自组装形成。将抗原与纳米佐剂混合即获得纳米疫苗体系。本发明聚合物纳米佐剂具有良好的稳定性与较强的免疫原性，可以有效促进抗原被树突状细胞等抗原呈递细胞的摄取与交叉呈递。体内免疫该纳米疫苗能够显著提高抗原特异性的体液与细胞免疫应答。本发明合成与纳米疫苗制备方法简单、操作简便、重复性好，适合于大规模生产。
主权项：1.一种表面胍基修饰的纳米佐剂材料，其特征在于，表面胍基修饰的纳米佐剂材料为 含有胍基的共聚物，其组成为: 聚乙二醇-b-聚己内酯-g-聚（胍基-乙基-甲基丙烯酸酯），其中ε-CL(ε-己内酯)与 BMPCL(γ-(2-溴-2-甲基丙酸酯)-ε-己内酯)的聚合度范围分别为30~35和3~3.5，胍基-乙 基-甲基丙烯酸酯的聚合度为3~105。 2.根据权利要求1所述的表面胍基修饰的纳米佐剂材料，其特征在于所述共聚物为三 嵌段共聚物，主链结构为聚乙二醇与聚己内酯嵌段共聚物，聚己内酯侧链含有胍基。 3.一种权利要求1所述的表面胍基修饰的纳米佐剂材料的制备方法，其特征在于包括 以下步骤： 1) 将干燥的聚乙二醇单甲醚（mPEG）加入Schlenk管中，称取定量的ε-己内酯（ε-CL）、 γ-(2-溴-2-甲基丙酸酯)-ε-己内酯（BMPCL）与辛酸亚锡加入反应管中，在氮气保护下于 120-130℃油浴中，搅拌反应10-20小时，待反应冷却后，加入二氯甲烷溶解产物，然后将溶 液滴加至冷乙醚中，过滤，取沉淀，真空干燥，得到聚乙二醇与聚己内酯嵌段共聚物大分子 引发剂mPEG-b-P(CL-co-BMPCL)； 2) 将步骤1）制备的mPEG-P(CL-co-BMPCL)，单体2-[（叔丁氧基羰基）氨基]乙基-甲基 丙烯酸酯（tBMA），以及二联吡啶溶于丁酮，将上述混合物反复进行三次除氧后，加入溴化亚 铜，在无氧和60℃条件下反应24小时，在纯水中反复透析提纯，冷冻干燥获得聚乙二醇-b- 聚己内酯-g-聚（2-[（叔丁氧基羰基）氨基]乙基-甲基丙烯酸酯）（mPEG-b- PCL-g-PtBMA）； 3) 将mPEG-b-PCL-g-PtBMA溶于三氟乙酸，室温搅拌2-5小时，在真空条件下将三氟乙 酸旋蒸掉，然后加入N,N-二甲基甲酰胺溶解产物，将所获溶液滴加到冷乙醚中，过滤，取沉 淀，用无水乙醚洗涤两次，真空干燥获得聚乙二醇-b-聚己内酯-g-聚（氨基-乙基-甲基丙烯 酸酯）（mPEG-b-PCL-g-PAEM）； 4) 将mPEG-b-PCL-g-PAEM溶于碳酸氢钠水溶液中，加入S-乙基异硫脲氢溴酸盐，室温 下搅拌反应48-96小时，然后在纯水中透析提纯，冷冻干燥后获得聚乙二醇-b-聚己内酯-g- 聚（胍基-乙基-甲基丙烯酸酯）（mPEG-b-PCL-g-PGEM，PECG）。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的聚乙二醇单甲醚的分子量为2000 g/ mol；所述的聚己内酯的分子量范围为3420-3990 g/mol；所述的聚（γ-(2-溴-2-甲基丙酸 酯)-ε-己内酯（BMPCL））的分子量范围为834-973 g/mol；所述的聚（胍基-乙基-甲基丙烯酸 酯）的分子量范围为516-18060 g/mol。 5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤1）中，单体ε-CL与聚乙二醇单甲醚的摩 尔比为30~35:1；BMPCL与ε-CL的摩尔比为1:10；辛酸亚锡的投料量为单体摩尔总数的 0.05%。 6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤2）中，单体tBMA与大分子引发剂mPEG- b-P(CL-co-BMPCL)的摩尔比为3~105:1。 7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤3）中，三氟乙酸的体积（mL）与mPEG-b- PCL-g-PtBMA的质量（g）比例为5:1。 8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤4）中，S-乙基异硫脲氢溴酸盐与mPEG- b-PCL-g-PAEM的摩尔比为6~7:1。 9.权利要求1或2任一所述的表面胍基修饰的纳米佐剂与蛋白抗原、多肽抗原、核酸、免 疫增强剂中任意一种或几种的复合物溶液或冻干粉制剂。 10.权利要求1或2任一所述的表面胍基修饰的纳米佐剂与抗原复合形成的纳米免疫疫 苗的应用，包括促进小鼠淋巴结与脾脏内的细胞因子表达与促进外源抗原被抗原递呈细胞 的交叉呈递效果。
申请号：CN201611119684.2
公开/公告号：CN106729700A
申请日：2016-12-08
公开/公告日：2017-05-31
申请/专利权人：天津千顺科技有限公司;中国医学科学院生物医学工程研究所
发明/设计人：靳忠胜;王伟伟;黄平升;孔德领
分类号：A61K39/39;C08F287/00;C08F220/34;C08G81/00
主分类号：A61K39/39
法律状态：实质审查
点击下载：表面胍基修饰的纳米佐剂材料及其制备方法与应用