中文摘要：本发明涉及一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法。本发明所述的猪肺炎支原体培养基由基础培养基和辅助培养基组成，其中：基础培养基主要成分有Hank′s液、乳蛋白水解物、酵母提取物、牛心提取物，可以通过高压蒸汽灭菌方式除菌，大大地减少了过滤除菌带来的污染风险；辅助培养基由猪血清、精氨酸、半胱氨酸、酚红溶液、青霉素等组成，猪血清通过钴照射除菌，其余成分过滤除菌后与灭活的猪血清混合。本发明培养基培养猪肺炎支原体兔化弱毒株的滴度达到109～1010CCU，培养时间最低可至40h，大大减少了陈旧菌、老龄菌的产生，并且猪血清用量可以低至8％，减少了猪血清带来的过敏应激反应，降低了企业生产成本。
主权项：1.一种猪肺炎支原体培养基，由基础培养基包括20×Hank′s 25～35ml、酵母提取物1 ～5g、乳蛋白水解物0.5～3g、牛心提取物5～12g、去离子水770～870ml，辅助培养基包括 5％精氨酸溶液1～5ml、5％半胱氨酸溶液1～5ml、5％辅酶Ι1～5ml、10万U/ml青霉素5～ 10ml和灭活的健康猪血清80～200ml组成。 2.根据权利要求1所述的一种猪肺炎支原体培养基，其特征在于它能培养猪肺炎支原 体兔化弱毒株，并且培养的CCU滴度可以达到109～1010，所需猪血清浓度不超过10％。 3.根据权利要求1所述的一种高效猪肺炎支原体培养基，其特征在于20×Hank′s液包 括20×Hank′s1和20×Hank′s2，其中： 20×Hank′s1：NaCl 12～16g、MgSO4.7H2O 0.1g～0.5g、KCl 0.4～1.0g、MgCl2.6H2O 0.1 ～0.5g、CaCl2 0.2～0.5g、去离子水100ml； 20×Hank′s2：Na2HPO4.12H2O 0.1～0.4g、KH2PO4 0.1～0.35g、葡萄糖1～5g、1％酚红溶 液2～4ml、去离子水96～98ml。 4.权利要求1所述的一种猪肺炎支原体培养基的制备方法，其特征在于制备步骤如下： (1)基础培养基的配制：按配比量取20×Hank′s 1 25～35ml、20×Hank′s 2 25～ 35ml，称取酵母提取物1～5g、乳蛋白水解物0.5～3g、牛心提取物5～12g、去离子水770～ 870ml，搅拌均匀，10M NaOH调pH至7.2～7.4，115℃高压灭菌20min； (2)辅助培养基的配制：按配比量取过滤除菌的5％精氨酸溶液1～5ml、5％半胱氨酸溶 液1～5ml、5％辅酶Ι1～5ml、10万U/ml青霉素5～10ml、56℃灭活的猪血清80～200ml。 5.权利要求1和4所述的一种猪肺炎支原体培养基，其特征在于它还包括高效猪肺炎支 原体固体培养基，配制方法是在上述基础培养中加入0.8～1.5％琼脂糖。
申请号：CN201710123741.2
公开/公告号：CN106906159A
申请日：2017-03-03
公开/公告日：2017-06-30
申请/专利权人：江苏南农高科技股份有限公司
发明/设计人：车巧林;董彦鹏;缪芬芳;耿晓眉;靳蒙蒙;胡静雅;沈晓红
分类号：C12N1/20;C12R1/35
主分类号：C12N1/20
法律状态：实质审查
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