中文摘要：本发明涉及一种黄曲霉毒素适配体亲和柱及其制备方法和用途。该亲和纯化柱利用化学修饰的固相载体，然后用黄曲霉毒素B1的核酸适配体与载体进行共价偶联。然后装填亲和柱。该适配体亲和柱主要用于对于食品、饲料、调味料、牛奶、血样以及其他多种样本中的黄曲霉毒素B1的纯化，以便于后期对样本中黄曲霉毒素B1的高效液相色谱（HPLC）检测和荧光检测。
主权项：1.一种黄曲霉毒素B1的适配体亲和柱，其特征在于包含有载体和黄曲霉毒素B1适配体。
2.根据权利要求1中所述的亲和柱，其特征在于适配体通过化学键偶联在载体上。
3.根据权利要求1中所述的亲和柱，其特征在于所述的适配体是核酸适配体，更具体的是寡聚脱氧核苷酸适配体。
4.根据权利要求3中所述的核酸适配体，其特征在于所述的适配体序列为序列1所描述的核酸序列。
5.根据权利要求1中所描述的适配体，其特征在于适配体是经过化学修饰的适配体。
6.根据权利要求5中所描述的适配体，其特征在于修饰方式包括但不限于氨基修饰、羧基修饰、巯基修饰及生物素修饰。
7.根据权利要求1中所述的适配体亲和柱，其特征在于所述的载体是琼脂糖凝胶或者化学合成的固相载体。
8.根据权利要求5中所述的亲和柱，其特征在于所述的琼脂糖凝胶包含但不限于N-羟基琥珀酰亚胺活化的琼脂糖凝胶、溴化氰活化的琼脂糖凝胶、交联的琼脂糖凝胶、聚丙烯酸琼脂糖凝胶、。
9.根据权利要求5中所描述的化学合成的固相载体载体，包括但不限于聚苯乙烯，多孔聚苯乙烯及交联多孔聚苯乙烯填料。
10.一种纯化黄曲霉毒素B1亲和柱制备方法，其特征在于
选择N-羟基琥珀酰亚胺活化后的载体，将载体干粉用1mmol/L的盐酸浸泡过夜进行活化；
每克活化的载体加入30-200nmol的适配体，在0.1M NaHCO 3，0.5M NaCl PH8.3的缓冲液中，室温偶联2小时，或者4℃偶联过夜；
偶联产物用1M Tris.HCl PH 8.0 室温反应2小时；
偶联好的载体-适配体，用20mM PH7.4的PBS洗涤；
用含有0.01%硫柳汞的10mM PBS PH7.4 洗涤黄曲霉毒素B1适配体-载体偶联产物，装柱，放于4℃保存。
11.一种黄曲霉毒素B1的适配体亲和柱，其用途在于对待检物中的黄曲霉毒素B1的富集和纯化。
12.根据权利要求11所述的待检物，其特征在于待检物包含但不限于粮食、饲料、牛奶及乳制品、调味料、水产、血液、尿液和水。
申请号：CN201710037561.2
专利号：CN106970172-A
公开/公告号：CN106970172A
申请/专利权人：北京美正生物科技有限公司
发明/设计人：张彦明
分类号：G01N30/60；G01N30/06；G01N33/544
主分类号：G01N30/60
法律状态：实质审查
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