中文摘要：本发明涉及一种基于RNAi双元载体培育转基因水稻的方法，属于水稻基因工程技术领域。目的片段的选择与克隆，目的片段的回文序列构建，克隆体系的选择和RNAi重组质粒构建，RNAi重组质粒的农杆菌转化，农杆菌介导法转化与水稻组织培养，转基因水稻的检测，转基因植株的抗逆性分析。本发明利用RNAi技术，有效降低了水稻Csn5基因表达，可用于培育具有一定抗性的水稻转基因株系，为作物品种改良和农业分子育种中应用提供技术支撑。
外文摘要：The invention relates to a two-element carrier based on RNAi transgenic rice method, which belongs to the rice gene engineering technology field. The choice of the target fragment with the cloning, a target fragment of the palindrome sequence construction, cloning system and the selection of the recombinant plasmid RNAi, RNAi recombinant plasmid of Agrobacterium transformation, Agrobacterium-mediated transformation and rice tissue culture, transgenic rice detection, the resistance of the transgenic plant analysis. This invention utilizes the RNAi technology, effectively reduces the rice Csn5 gene expression, can be used for cultivating rice with a certain resistance of transgenic lines, crop varieties and agricultural molecular breeding in to provide the technical support application.
主权项：一种基于RNAi双元载体培育转基因水稻的方法，其特征在于：包括下列步骤： (1)构建特异性重组系统的水稻转化载体； (2)利用该载体转化水稻愈伤组织，筛选、分化产生转基因水稻植株； (3)种植转基因水稻植株，检测Csn5基因在转基因水稻中的不同部位，包括根、茎、叶、果实中的表达水平，获得Csn5基因在水稻中被特异性抑制； (4)种植下一代转基因水稻株系，进一步分子检测Csn5基因的表达，证实Csn5基因已经被有效抑制，转基因植株表现出一定的遗传稳定性。通过耐盐胁迫生理学实验，证实上述转基因水稻植株能耐受较高浓度的盐胁迫，以NaCl计，0.8％。
申请号：CN201710913770.9
专利号：CN107446948A
公开/公告号：CN107446948A
申请/专利权人：吉林工商学院
发明/设计人：郭立泉; 刘东; 吴铭; 徐淼
分类号：C12N15/82; A01H5/00;
主分类号：C12N15/82
法律状态：有效专利
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